braf基因v600e突變
BRAF是人類最重要的原癌基因之一，大約8%的人類腫瘤有BRAF突變。 BRAFV的突變多為BRAFV600E突變，主要發(fā)生在黑色素瘤、結(jié)腸癌和甲狀腺癌。 該突變導(dǎo)致下游MEK-ERK信號(hào)通路持續(xù)激活，對腫瘤生長、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移至關(guān)重要，是對抗黑色素瘤等V600E突變腫瘤的有效靶點(diǎn)之一。 2011年，首個(gè)BRAFV600E靶向抑制劑獲得FDA批準(zhǔn)上市，用于治療BRAFV600E突變的晚期黑色素瘤患者。 有效延長了患者的無進(jìn)展生存期和總生存期，取得突破性治療效果。 也是典型的基于基因診斷的靶向治療藥物。 然而，耐藥性的出現(xiàn)限制了藥物的治療效果，對耐藥機(jī)制、新藥開發(fā)以及預(yù)防或延緩耐藥性的研究成為亟待解決的關(guān)鍵問題。 目前發(fā)現(xiàn)了兩種BRAF抑制劑，一種是廣譜的RAF激酶抑制劑，它還能抑制RAF的各種亞型和其他激酶，如KIT和血管內(nèi)皮生長因子受體(VEGFR)。 其代表有索拉非尼、RAF-265、XL-281等。 這些抑制劑具有廣譜抗腫瘤和抗血管生成作用，在抗腫瘤治療中一般不需要限制BRAF基因的突變狀態(tài)。 黑色素瘤，尤其是BRAF突變的惡性黑色素瘤，目前尚無明顯的臨床報(bào)道。 另一種是BRAFV600E抑制劑，對BRAF有較高的抑制活性，尤其是BRAFV600E，以vemurafenib、PLX4032)和GSK2118436 (dabrafenib)為代表，對BRAFV600E突變的黑色素瘤患者有明顯的臨床效果。
braf基因檢測15號(hào)外顯子突變v600e是什么意思?
即BRAF基因第15外顯子第600位氨基酸由纈氨酸(簡稱V)突變?yōu)楣劝彼?簡稱E)，具有這種突變的腫瘤患者對靶向藥物達(dá)拉非尼、韋羅非尼敏感。 BRAF基因突變與消化道腫瘤[關(guān)鍵詞] BRAF基因[關(guān)鍵詞] BRAF基因；基因突變；消化道腫瘤；文獻(xiàn)綜述【中國圖書館分類編號(hào)。 ]]Q754；R735近年來，BRAF基因在腫瘤中的作用越來越受到重視。 BRAF基因編碼一種絲氨酸/蘇氨酸特異性激酶，是一種RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路(MEK :絲裂原/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶；ERK:細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶；Mapk:絲裂原活化蛋白激酶是一種重要的轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的各種生物事件，如細(xì)胞生長、分化和凋亡。 因此，在以往的研究中，人們更加關(guān)注RAF蛋白作為RAS蛋白關(guān)鍵效應(yīng)分子的功能。 1988年，Ikawa等發(fā)現(xiàn)該基因可誘導(dǎo)原代禽細(xì)胞增殖和NIH3T3細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并首次將其鑒定為癌基因[2]。 2002年，Davies等人發(fā)現(xiàn)約66%的惡性黑色素瘤和15%的結(jié)腸癌存在體細(xì)胞錯(cuò)義突變[3]。 這一激動(dòng)人心的發(fā)現(xiàn)使人們第一次認(rèn)識(shí)到，BRAF蛋白可能在人類腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中獨(dú)立于RAS蛋白發(fā)揮作用[4]。 此后，人們對BRAF基因，尤其是其生物學(xué)行為和臨床意義給予了極大的關(guān)注。 1 BRAF結(jié)構(gòu)與激活BRAF基因是RAF家族的成員，該家族還包括ARAF和RAF1(CRAF)基因。 BRAF基因位于7q34，長約190kb，轉(zhuǎn)錄的mRNA長2.5kb，編碼一種783個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，相對分子量為94000 ~ 95000[5]。 BRAF蛋白由783個(gè)氨基酸組成，其功能從N端到C端依次為RAS結(jié)合區(qū)、Cys、Gloop和激活區(qū)。 在大多數(shù)組織和細(xì)胞類型中，BRAF是MEK/ERK最關(guān)鍵的激活劑[68]。 它主要有三個(gè)保守區(qū)域：CR1、CR2和CR33。 CR1地區(qū)包含RBD (ras帶型域)和Cys (Cys)。 CR3是含有甘氨酸環(huán)(Gloop)的激酶結(jié)構(gòu)域，是A TP的結(jié)合位點(diǎn)和激活區(qū)。 該區(qū)域T598和S601位點(diǎn)的磷酸化對BRAF蛋白的激活非常重要。 BRAF蛋白的主要磷酸化位點(diǎn)為S364、S428、T439、T598和S601。 BRAF蛋白的完全激活需要T598和S601位點(diǎn)的磷酸化，這兩個(gè)位點(diǎn)氨基酸的置換將導(dǎo)致激酶的持續(xù)激活。 此外，這兩個(gè)位點(diǎn)的磷酸化對于BRAF誘導(dǎo)的ERK激活和NIH3T3轉(zhuǎn)化也很重要[9]。 BRAF突變的類型表明，在各種人類惡性腫瘤中存在不同比例的BRAF突變，如惡性黑色素瘤、結(jié)直腸癌、肺癌、甲狀腺癌、肝癌和胰腺癌。 BRAF突變主要有兩種類型：1.11%甘氨酸環(huán)位于外顯子11，如G463、G465、G468等的點(diǎn)突變。 2.89%的突變發(fā)生在外顯子15的激活區(qū)，其中約92%位于核苷酸1799，t突變?yōu)锳(T1799A以前被認(rèn)為是T1796A)，導(dǎo)致其編碼的谷氨酸被纈氨酸取代(V600E以前被認(rèn)為是V599E)。 此外，不到1%的癌癥組織同時(shí)存在BRAF突變和RAS突變，而在這1%中，幾乎所有的BRAF突變都是非V600E突變。 以上兩類突變均可提高BRAF激酶活性和NIH3T3細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力，但后者更為重要。 V600E突變可以模擬T598和S601的磷酸化，激活BRAF蛋白[3]。 BRAF蛋白突變激活的生物學(xué)效應(yīng)導(dǎo)致MEK/ERK激活，通過轉(zhuǎn)錄物或非轉(zhuǎn)錄物影響腫瘤進(jìn)展：在細(xì)胞質(zhì)中，ERK可以磷酸化并激活p90RSKs，然后通過使凋亡誘導(dǎo)因子BRD失活或激活CREB (camp應(yīng)答元件結(jié)合蛋白，一種可以誘導(dǎo)與細(xì)胞存活相關(guān)的基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子)來影響細(xì)胞凋亡[10]。 激活的ERK還可影響肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)的活性，導(dǎo)致組織侵襲和轉(zhuǎn)移。 活化的ERK易位至細(xì)胞核可影響許多惡性腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)：Cyline D表達(dá)增加使細(xì)胞生長自我滿足；促凋亡蛋白Bim家族表達(dá)的減少減少了細(xì)胞凋亡。 血管內(nèi)皮生長因子(血管和血管內(nèi)生長因子)的表達(dá)增加，促進(jìn)血管生成。 cmyc表達(dá)的增加使細(xì)胞對抗生長信號(hào)不敏感。 整合素表達(dá)的增加促進(jìn)了組織的侵襲和轉(zhuǎn)移。 ERK還能誘導(dǎo)mdm2的表達(dá)，MDM 2能抑制P53的活性。 激活BRAF依次激活MEK和ERK，ERK活性升高對黑色素瘤細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)基本明確，包括促進(jìn)細(xì)胞增殖和侵襲、改變整合素表達(dá)、降低e-cadherin表達(dá)和增加基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)分泌[11]。 RNA干擾(RNAi)技術(shù)可以有效降低MAPK活性，抑制細(xì)胞生長，促進(jìn)細(xì)胞凋亡[12]。 將突變的BRAF基因轉(zhuǎn)染到黑素細(xì)胞中可導(dǎo)致其表型的惡性轉(zhuǎn)化。 當(dāng)將該細(xì)胞株接種到裸鼠體內(nèi)時(shí)，發(fā)現(xiàn)其具有攻擊性生長并導(dǎo)致腫瘤形成[13]。 體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)都證實(shí)了人黑色素瘤細(xì)胞系是有效的。 特異性MEK 激酶抑制劑普遍敏感［14］，針對由BRAF 突變引起的下游信號(hào)通路的激活，采用特異性MEK 激酶抑制劑阻斷該通路，能夠有效抑制鼠惡性黑色素瘤的肺轉(zhuǎn)移，并能使已產(chǎn)生的肺轉(zhuǎn)移灶縮小甚至消失［15］。 Houben 等［16］的研究還發(fā)現(xiàn)，BRAF 的突變狀態(tài)與惡性黑色素瘤的預(yù)后有關(guān)，存在BRAF 突變者預(yù)后不良。 這些都表明BRAF 突變對于腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)鍵性作用，是潛在的診斷標(biāo)記和治療靶點(diǎn)。 4 BRAF 突變與消化道腫瘤近兩年來，BRAF 突變與消化道腫瘤關(guān)系漸受關(guān)注，其中以結(jié)直腸癌(CRC)研究最為廣泛。 現(xiàn)有文獻(xiàn)表明，多數(shù)消化道腫瘤中均存在不同頻率的BRAF 基因突變。 除突變類型外，較為一致的是，在同一腫瘤中，BRAF 和Kras 突變具有互相排斥的性質(zhì)，兩者突變從不同時(shí)出現(xiàn)，可能是相互獨(dú)立的遺傳事件［1720］。 4.1 結(jié)直腸癌多數(shù)報(bào)道CRC 中BRAF 突變率在15％左右，且90％以上為V600E 突變，并與Kras 突變負(fù)相關(guān)［2122］。 Nagasaka 等［20］發(fā)現(xiàn)9％(21/234)的CRC 存在BRAFV600E 突變，31％(72/234)的CRC 存在Kras 突變，且同一腫瘤中兩者從不同時(shí)存在。 而Ikenoue 等［1,23］認(rèn)為，在結(jié)直腸癌中，BRAFV600E 突變能提高ERK 、NFκB活性和NIH3T3轉(zhuǎn)化能力，但Gloop 區(qū)的點(diǎn)突變及D593V 、G595R 等突變則降低激酶活性，對NFκB活性和NIH3T3轉(zhuǎn)化能力無影響。 通常認(rèn)為CRC 按腺瘤―腺癌的順序演變而來，但越來越多研究表明可能存在另一條途徑，即由齒狀息肉包括HP 、MP 、SA 等演變而來。 Kambara 等［24］研究發(fā)現(xiàn)，在無蒂齒狀腺瘤(SSA)和混合性息肉(MP)中，BRAF 突變較齒狀腺瘤(SA)、增生性息肉(HP)和腺瘤(AD)頻發(fā)；高CpG 島甲基化表型(CIMP)的齒狀息肉和CRC 較CIMP 低或陰性的齒狀息肉和CRC 常見。 他們認(rèn)為高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定(MSIH)的散發(fā)性CRC 可能起源于SSA 而非AD 。 Chan 等［25］報(bào)道，36％(18/50)的HP 、20%(2/10)的MP 、100%(9/9)的SA 存在BRAF 突變，90%(26/29)為V600E 突變。 他們推測，HP 向SA 演進(jìn)可能與BRAF 獲得性突變有關(guān)，CRC 可能循HPSA 腺癌演變而來。 此外，Yuen 等［17］研究還發(fā)現(xiàn)，BRAF 突變與結(jié)直腸癌分期顯著相關(guān)(Dukes’A、B 期>C、D 期) ，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但與性別、年齡、腫瘤分化狀態(tài)、部位無關(guān)。 4.2 胰腺癌最近的兩項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在胰腺癌臨床標(biāo)本和胰腺癌細(xì)胞株COLO357中均能檢測到BRAF V600E突變［2627］。 Calhoun 等［27］檢測了9例Kras 野生型的胰腺癌組織，發(fā)現(xiàn)3例含有BRAF V600E突變，突變率為33%(3/9)，而在74例含Kras 突變的胰腺癌組織中則未檢測到BRAF 突變，且在BRAF 和Kras 均為野生型的胰腺癌組織中均未發(fā)現(xiàn)其信號(hào)通路成員MEK 、ERK 、RAP1B 等的突變。 4.3 胃癌在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程中，BRAF 突變是稀有事件。 Wu 等［28］檢測了16例胃癌細(xì)胞株和62例胃癌組織標(biāo)本BRAF 和Kras 的突變情況，發(fā)現(xiàn)無一例細(xì)胞株存在BRAF 突變，僅1例胃癌組織存在BRAFV600E ，而31％的細(xì)胞株及1.6%的組織標(biāo)本存在Kras 突變。 Oliveira 等［19］發(fā)現(xiàn)，124例微衛(wèi)星穩(wěn)定性(MMS)胃癌僅1例存在V600E 突變。 37例MSI 胃癌無一例突變，但Kras 突變頻率較高，提示BRAF 突變可能與胃癌的發(fā)生無關(guān)，而Kras 突變可能與伴DNA 錯(cuò)配修復(fù)(MMR)缺陷的胃癌的發(fā)生有關(guān)。 4.3 其它在其它類型的消化道腫瘤方面，Tannapfel 等［29］認(rèn)為BRAF 突變在膽管癌(CC)中較常見，而在肝細(xì)胞癌(HCC)中少見，CC 中BRAF 和KRAS 的突變率分別為22％(15/69)和45％(31/69)，且兩種突變不同時(shí)出現(xiàn)在同一CC 中。 而25例HCC 均未檢測到RAF 和Kras 突變。 Blaker 等［30］發(fā)現(xiàn)在21例散發(fā)性小腸腺癌中13例存在突變，12例為Kras 突變，1例為BRAF 突變，他們認(rèn)為在小腸癌的發(fā)生發(fā)展過程中，RASRAFMEKERKMAPK 通路的激活常由Kras 突變引起，偶由BRAF 突變引起。 Perren 等［31］檢測了130例胰腺、胃腸道、肺等內(nèi)分泌腫瘤中BRAF 的突變情況，發(fā)現(xiàn)47％的乳頭狀甲狀腺癌、1例分化良好的胃腸道內(nèi)分泌癌存在V600E 突變，而其它腫瘤中則未發(fā)現(xiàn)。 5 結(jié)束語如前所述，BRAF 突變狀態(tài)與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及臨床結(jié)局有關(guān)，可能是一種新的惡性腫瘤相關(guān)基因、一個(gè)新的基因治療靶點(diǎn)。 就消化道腫瘤而言，雖然現(xiàn)有研究證實(shí)存在不同頻率的BRAF 突變，但由于對BRAF 突變的研究只有短短幾年時(shí)間，尚缺乏大規(guī)模、系統(tǒng)而深入的研究，仍然有很多問題需要進(jìn)一步闡明。 例如BRAF 突變率和突變類型究竟怎樣；BRAF 獲得性突變是否發(fā)生在腫瘤進(jìn)展過程的早期階段，究竟是否具有確切的病理學(xué)意義，是否是良性腫瘤惡變的先兆；BRAF 突變的生物學(xué)效應(yīng)及其分子機(jī)制，其與消化道腫瘤發(fā)生和發(fā)展的關(guān)系；除V600E 突變外，其它類型的突變是否具有相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)；在細(xì)胞周期調(diào)控過程中，是否象其它癌基因一樣，需要“二次打擊”；能否通過干預(yù)BRAF 突變來治療消化道腫瘤等這些問題仍有待進(jìn)一步論證。 但BRAF 作為一種癌基因，BRAF 蛋白作為一種重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，在細(xì)胞內(nèi)參與廣泛的細(xì)胞事件，其重要性是無疑的。 對BRAF 突變研究的深入，必將豐富現(xiàn)有對惡性腫瘤分子機(jī)制的認(rèn)識(shí)，可望為闡明消化道惡性腫瘤致病的分子機(jī)制，尋找新的治療途徑與靶點(diǎn)提供思路，為有效干預(yù)消化道腫瘤、降低患者死亡率提供理論依據(jù)。
braf基因v600e突變是什么意思
BRAF基因是一種原癌基因，如果出現(xiàn)了突變，身體患癌的可能性就比較大。 而V600E代表的是BRAF基因最容易癌變的一個(gè)位點(diǎn)。 拓展資料經(jīng)過大量研究證實(shí)，BRAF-V600E基因突變與甲狀腺癌的診斷、治療和判斷預(yù)后都有重要聯(lián)系。 診斷：細(xì)針穿刺是診斷甲狀腺癌最好的手段之一，創(chuàng)傷小，準(zhǔn)確率也比較高。 但是仍然有20-30%的患者不能完全確診。 如果聯(lián)合檢測BRAF-V600E基因，如果檢測到基因突變，那么就基本可能診斷為甲狀腺乳頭狀癌，特異性幾乎可以達(dá)到100%。 治療：診斷甲狀腺乳頭狀癌后，需要接受規(guī)范的治療。 如果治療前就檢測到BRAF-V600E基因突變，說明腫瘤侵襲性比較強(qiáng)，可能合并多個(gè)病灶，所以在手術(shù)方案的選擇上，就傾向于更大范圍的手術(shù)方案，以保證手術(shù)徹底性。 預(yù)后：如果手術(shù)后，檢測到BRAF-V600E基因突變，說明該腫瘤可能侵襲性比較強(qiáng)，復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移概率比沒有BRAF-V600E基因突變的更高，所以要密切隨訪觀察。 具體檢測方法：手術(shù)前：利用細(xì)針穿刺的標(biāo)本檢測，可以幫助診斷，對治療方案的指導(dǎo)也有一定價(jià)值。 檢測時(shí)間大概一周。 手術(shù)后：利用切除標(biāo)本做成的石蠟切片檢測，可以評(píng)估預(yù)后。 檢測時(shí)間大概一周。
braf基因v600e突變嚴(yán)重嗎
BRAFV600E突變PTC患者的臨床特征Nucera等，研究發(fā)現(xiàn)BRAFV600E基因突變不僅可啟動(dòng)正常的甲狀腺濾泡細(xì)胞腫瘤發(fā)生，還能維持和促進(jìn)PTC的侵襲性。 BRAF為一種鳥苷酸結(jié)合蛋白R(shí)AS活化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在調(diào)節(jié)有絲分裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路中發(fā)揮重要作用，而MAPK信號(hào)通路可正常調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分裂和分化；也可因RAF家族成員致癌性突變體的形成而引發(fā)癌癥，其中BRAFV600突變體的產(chǎn)生顯著增強(qiáng)了BRAF的活性，從而導(dǎo)致癌細(xì)胞分裂失控。 項(xiàng)目摘要BRAF基因突變在甲狀腺乳頭狀癌和未分化癌頻發(fā)，且與腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。 V600E是BRAF的經(jīng)典突變類型，研究非常深入并正嘗試運(yùn)用于臨床。 V599Ins插入突變是新近發(fā)現(xiàn)的突變類型，其在甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚不清楚。 前期在轉(zhuǎn)移性甲狀腺癌的多個(gè)病灶中檢測到這一突變（Human Pathology 2010），293細(xì)胞初步證實(shí)其可能為功能獲得型突變，可使下游MAPK信號(hào)通路持續(xù)激活，細(xì)胞增殖明顯加快。 以上內(nèi)容參考：百度百科-BRAFV599Ins插入突變在難治性甲狀腺癌
